Abstract We aimed to compare the effect of three estradiol benzoate (EB) doses on follicular wave emergence (FWE) and dominant follicle growth of suckled Nelore cows submitted to TAI (D0). On a random day of estrous cycle (D−10), multiparous (MULT; n=36) and primiparous (PRIM; n=20) suckled Nelore cows received an intravaginal progesterone (P4) device and were assigned in three groups. Cows in the EB-1 (n=20), EB-1.5 (n=15) or EB-2 (n=21) groups received, respectively, an im treatment with 1, 1.5 or 2 mg EB. A subgroup (n=10-13 cows/group) were subject to daily ovarian evaluations from D−10 to D0. On D−2, P4 devices were removed, and all cows received the same treatment: 1 mg estradiol cypionate, 0.53 mg sodium cloprostenol, and 300 IU eCG. Statistical analyses were performed considering only the main effects of treatment group and parity order. The proportion of cows with a synchronized FWE and the moment of the FWE did not differ (p>0.05) among the treatment groups (overall: 80% [28/35] and 4.1 ± 0.4 days); however, the FWE occurred earlier (p=0.007) in MULT (3.8 ± 0.2 days) than PRIM (5.1 ± 0.4) cows. The proportion of animals detected in estrus was greater (86% [31/36] vs. 70% [14/20]; p=0.02) and the dominant follicle was larger on D−2 (9.7 ± 0.3 mm vs. 7.8 ± 0.7 mm; p=0.006) and D0 (11.9 ± 0.4 mm vs. 10 ± 0.5 mm; p=0.008) in MULT than PRIM cows. In conclusion, the three EB doses presented similar efficiency to synchronize the FWE in suckled Nelore cows. Moreover, a delayed FWE and smaller dominant follicle is observed in PRIM cows, contributing to the reduced reproductive performance in this parity category when using similar TAI protocols of MULT cows.

O presente trabalho objetivou avaliar a eficácia do tratamento Ovsynch associado à inseminação artificial em tempo prefixado em vacas Bos taurus e Bos indicus. Foram utilizados rebanhos das raças Holandesa, Caracu, Nelore e Mantiqueira. Também foi incluído um rebanho de vacas Gir, com problemas de fertilidade. Cada rebanho foi dividido em três grupos. O grupo 1 recebeu o tratamento Ovsynch e foi inseminado em tempo prefixado. O grupo 2 foi inseminado no cio induzido com cloprostenol. O grupo 3 foi inseminado no cio natural. As taxas de concepção e de prenhez foram determinadas por ultra-sonografia. Não existiu interação significativa das variáveis reprodutivas analisadas para rebanho, idade, período pós-parto, número de parição e presença do bezerro. A taxa de concepção não diferiu (P>0,05) entre os grupos, ao passo que a taxa de prenhez foi superior (P<0,05) nos grupos 1 e 2 em comparação ao grupo 3. No rebanho Gir, o tratamento Ovsynch não alterou a taxa de concepção nem a de prenhez. Independentemente da raça, os tratamentos Ovsynch e cloprostenol não afetam a taxa de concepção, mas melhoram a taxa de prenhez. O tratamento Ovsynch não aumenta a fertilidade de vacas com problemas reprodutivos inespecíficos.

The present study aimed to evaluate the efficiency of Ovsynch treatment associated with prefixed-time artificial insemination on Bos taurus and Bos indicus cows. Herds of Holstein, Caracu, Nelore and Mantiqueira breeds were used. A herd of Gir cows with poor reproductive performance was also included. Each breed was divided in tree groups. Group 1 received Ovsynch treatment and was inseminated at prefixed time. Group 2 was induced to estrus with cloprostenol and inseminated thereafter. Group 3 was inseminated at natural heat. Conception and pregnancy rates were determined by ultra-sound. No significant interactions were detected among breeds, age, parity, postpartum period and lactating cows with or without their calves. Conception rates did not differ (P>0.05) among groups while pregnancy rate was higher (P<0.05) for group 1 and 2 comparing to group 3. In the Gir herd Ovsynch treatment did not enhance conception nor pregnancy rates. Independently of breed, conception rate is similar after Ovsynch, cloprostenol and control treatments, and pregnancy rate can be improved with Ovsynch and cloprostenol treatments. In cows with unspecific reproductive ovarian disorders, Ovsynch treatment do not enhance conception or pregnancy rates.

O presente trabalho foi conduzido com o objetivo de avaliar o efeito da utilização de diferentes fontes de gonadotrofinas para maturação in vitro dos oócitos bovinos fecundados e desenvolvidos in vitro sobre as taxas de clivagem (TC) e de blastocistos (TBL). Oócitos imaturos provenientes de ovários de vacas de abatedouro foram submetidos a maturação in vitro sob diferentes condições: meio TCM 199, acrescido de 10% de soro de vaca em estro (SVE), aditivos, hepes, NaHCO3, piruvato de sódio, antibióticos (meio B-199), 20 UI/mL de PMSG e 10 UI/mL de hCG (PMSG/hCG) ou meio B-199, acrescido de 5 mg/mL de FSH e 5 mg/mL de LH (FSH/LH). Seguidos 24 h de cultura a 38,5ºC em atmosfera com 5% de CO2, os oócitos maturos foram incubados com sêmen descongelado durante 18 a 21 horas. Após esse período, os oócitos foram transferidos para placas contendo microgotas de meio Ménezo suplementado com 10% de SVE e células epiteliais do oviduto bovino em suspensão, cobertas com óleo de silicone, os quais permaneceram em cultura por mais 9 dias. Os dados foram analisados pelo teste do Qui-quadrado. A TC e a TBL, para PMSG/hCG e FSH/LH, foram 60 e 13,9% e 61,2 e 10,6%, respectivamente. Não houve diferença entre os tratamentos com relação a TC ou a TBL. Esses resultados sugerem que ambas as fontes de gonadotrofinas podem ser utilizadas para maturação in vitro dos oócitos fecundados e desenvolvidos in vitro.

This study aimed to evaluate the effect of different gonadotropin sources for in vitro maturation of bovine oocytes fertilized and developed in vitro on cleavage (CR) and blastocysts rates (BLR). The immature oocytes from slaughterhouse cows ovaries were matured in vitro under different conditions: TCM 199 medium with 10% eostrous cow serum (ECS), aditives, hepes, NaHCO3, sodium pyruvate, antibiotics (B-199 medium), 20 UI/mL PMSG and 10 UI/ml hCG (PMSG/hCG) or B-199 medium with 5 mg/mL FSH and 5 mg/mL LH (FSH/LH). After 24 hours of culture at 38.5°C with 5% CO2 in air the mature oocytes were incubated with frozen-thawed semen for 18-21 hours. After this, the oocytes were transferred into microdroplets of Ménezo medium with 10% ECS and bovine oviduct ephitelial cells (BOEC) in suspension and were further cultured for 9 days. The data were analyzed by chi-square test. The CR and BLR for PMSG/hCG and FSH/LH were 60 and 13.9% and 61.2 and 10.6%, respectively. There was no difference between treatments regarding to CR and BLR. The results indicate that both gonadotropin sources can be used for in maturation medium of oocyte fertilized and developed in vitro.

Dez vacas multíparas, secas, foram distribuídas aleatoriamente em dois grupos de cinco animais cada. Nos dias 8 a 12 do diestro, o primeiro grupo recebeu 100 ml de anti-soro contra líquido folicular livre de esteróides (anti-LFb) produzido em ovelhas ovariectomizadas. O segundo grupo (controle) recebeu 100 ml de soro de ovelhas não-imunizadas. Seis horas após a aplicação, os dois grupos foram superovulados com FSH (18 NIH-FSH-S1 unidades) e LH (0,29 NIH-LH-S1 unidades) administrados em quantidades decrescentes durante quatro dias. Na manhã do terceiro dia, foi administrada uma dose luteolítica de cloprostenol. Duas inseminações foram realizadas 48 e 60 horas após. Os embriões foram recuperados pelo método cervical 7 dias após a primeira inseminação. Amostras de sangue foram coletadas durante todo o período experimental para determinar, por radioimunoensaio, as concentrações plasmáticas de FSH, LH e progesterona. Todas as vacas do grupo imunizado e 3 do grupo controle apresentaram mais de 2 CL. Não existiu diferença significativa (P>0,05) na taxa de ovulação entre os grupos imunizado e controle (14,4 e 9,9, respectivamente). O número de embriões recuperado não foi significativamente diferente (P>0,05) entre os grupos, embora o grupo imunizado tenha apresentado maior número de embriões transferíveis (3,4 ± 1,0 versus 0,8 ± 0,4, P<0,05). As concentrações de gonadotrofinas plasmáticas não foram correlacionadas com a taxa de ovulação ou com o número de embriões recuperados. As concentrações de progesterona plasmática foram positivamente correlacionadas (r = 0,88, P<0,01) com a taxa de ovulação. Os resultados sugerem que o anti-LFb, aplicado antes da superovulação, não reduz a variabilidade da resposta ovariana.

Ten multiparous non-lactating cows were randomly assigned to one of two groups. On days 8 to 12 after estrus, the first group was given 100 ml antiserum against steroid-free bovine follicular fluid (anti-bFF), which was produced in ovariectomized sheep. The second group (control) was given 100 ml nonimmune ovariectomized sheep serum. Six hours after injection, both groups were superovulated with FSH (18 NIH-FSH-S1 units) and LH (0.29 NIH-LH-S1 units) in a 4-day decreasing regime. On the morning of the third day a luteolytic dose of prostaglandin F2alpha analogue (cloprostenol) was given. Artificial inseminations (AI) were done 48 and 60 h later. Embryos were collected 7 days after AI by a nonsurgical method. Blood samples were taken throughout the experimental period and plasma concentrations of FSH, LH and progesterone were determined by radioimmunoassay. All cows from the immunized group, and 3 out of 5 cows in the control group, had more than 2 CL. There was no significant difference (P>0.05) in the ovulation rate between immunized and control groups (14.4 and 9.9, respectively). The number of recovered embryos was not significantly different (P>0.05) between groups, although cows immunized against bFF had a greater number of transferable embryos (3.4 ± 1.0 versus 0.8 ± 0.4, P<0.05). Plasma gonadotrophin concentrations were not correlated with either ovulation rate or number of recovered embryos. Plasma progesterone concentration was positively correlated (r = 0.88, P<0.01) to ovulation rate. Results suggested that passive immunization of cows with anti-bFF before superovulation did not reduce the variability of ovarian response.

O presente trabalho objetivou determinar o efeito do líquido folicular bovino tratado com carvão ativado (LFb) na secreção do hormônio folículo estimulante (FSH) de novilhas pré-púberes ovariectomizadas ou intatas. A aplicação de LFb (quatro injeções de 10 ml com intervalo de 8 horas) provocou uma queda de aproximadamente 44% na concentração plasmática de FSH nas novilhas ovariectomizadas, mas não teve efeito nas novilhas intatas. Não foi observada hipersecreção de FSH após o término da aplicação do LFb. Esses resultados sugerem que proteínas presentes no LFb atuam ao nível hipofisiário para inibir a secreção de FSH e, diferentemente das intatas, as novilhas ovariectomizadas constituem um modelo adequado para evidenciar esse efeito, particularmente quando o LFb possui reduzida atividade supressora do FSH.

The aim of the experiment was to determine whether charcoal-treated bovine follicular fluid (bFF) removed from visible (< 22 mm) follicles altered the secretion of follicle-stimulating hormone (FSH) in intact and ovariectomized prepubertal heifers. After a 10-ml injection of bFF given at three consecutive 8-h intervals, secretion of FSH was depressed in approximately 44% of the ovariectomized heifers but there was no effect in intact heifers. When the bFF treatment ceased, there were no rebound effects on FSH concentrations above that of controls pretreatment levels. These results suggest that proteins from bFF act at the pituitary level to inhibit FSH secretion and, differently of the intact, the ovariectomized heifer is an adequate model to put this effect in evidence, particularly when the bFF have low FSH suppressing activity.